培養(yǎng)基傾注溫度
1、培養(yǎng)基的傾注時(shí)適宜溫度約45℃。培養(yǎng)基置手心感覺不燙,但是置手背感覺燙時(shí),培養(yǎng)基溫度大約就是45℃。培養(yǎng)基傾注時(shí)溫度太高的話,凝固時(shí)間較長,另外皿蓋上會(huì)有大量冷凝水,不利于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。溫度太低則容易出現(xiàn)倒板過程中瓶中培養(yǎng)基部分凝固的現(xiàn)象。
2、有些培養(yǎng)基需要加入添加成分,這些添加成分在加入前應(yīng)先放置到室溫,避免冷的液體造成瓊脂凝結(jié)或形成片狀物。
3、目前多數(shù)實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)基滅菌后會(huì)放置水浴或者烘箱中,需使用的時(shí)候拿出來直接倒板。但培養(yǎng)基靜置時(shí)間不宜過長,靜置時(shí)間一般不超過4小時(shí)。靜置時(shí)間過長,培養(yǎng)基中瓊脂可能會(huì)少量凝固,形成類似絮狀析出。
4、在實(shí)驗(yàn)過程中不可避免因特殊情況而導(dǎo)致未倒板培養(yǎng)基已凝固,凝固后培養(yǎng)基可重新加熱溶解。一般來說沸水浴或者電磁爐加熱,不能重新再滅一次菌。
傾注量
一般平板傾注量在18-20ml左右,如果培養(yǎng)時(shí)間超過48小時(shí)或者是培養(yǎng)溫度高于40℃,為防止水分過量蒸發(fā)導(dǎo)致平板開類,傾注量一般是25ml左右。一些培養(yǎng)皿會(huì)有刻度,按照刻度傾注即可。
平板氣泡
倒板過程中容易出現(xiàn)氣泡,特別是像BS瓊脂這類需要搖勻后倒板的培養(yǎng)基。氣泡過多的話會(huì)影響結(jié)果觀察,倒平板時(shí)盡量緩慢倒入,將氣泡留在瓶子底部。平板中有少量氣泡的話,可以把氣泡搖到平板壁上,這樣不會(huì)影響結(jié)果觀察。