已解決
色譜法
用色譜學方法檢測二惡英類化學物質首先需進行樣本中待分析物的提取和凈化，這是由于分析物在樣本中含量低（ppt級），超痕量分析很容易受基質中其它成分的影響。然后色譜柱的分離，并聯用檢測器進行定性、定量。下面將分別介紹以上各步。
提取 這步目的在于使待測物游離，并萃取進入用于抽提的溶劑中。該步對于檢測的重復性至關重要，主要是溶劑的選擇和提取方法的選擇，且不同的樣本需采用不同的提取方法。對于土壤、灰塵等樣本使用溶劑有甲苯、乙烷、二氯甲烷、二氯甲烷和丙酮混合液（1：1體積比）、二氯甲烷和丙烷混合液（1：1體積比）、苯，提取時間為12~60小時。并且通常采用索氏抽提，Hengstmann等曾研究采用超音速索氏抽提（supersonic Soxhlet extraction），超臨界流體抽提（supercritical fluid extraction）也已使用，Barnabas對此進行了詳細綜述。對生物樣本一般是在冰凍后與無水硫酸鈉共同研磨去除水分，然后再采用合適的溶劑提取。常用溶劑有：輕石油-丙酮-乙烷-二乙基乙醚（18：10：5：2體積比）、丙酮-乙烷（1：1體積比）、丙酮-戊烷（3：7體積比）、丙請、二氯甲烷和乙烷混合液（1：1體積比）、氯仿-甲醇-乙烷混合液（1：1：1體積比）。其中二氯甲烷和乙烷混合液用于血樣，丙請和氯仿-甲醇-乙烷混合液用于奶樣，其余用于脂肪和肌肉組織。血樣提取前常添加乙醇和硫酸銨飽和溶液，然后再抽提。奶樣則先用甲酸處理。生物樣本提取方法，除血樣和奶樣是于室溫下振蕩提取外，其它樣品一般用Dean Stark的儀器進行索氏抽提。水樣中二惡英的抽提一般使用二氯甲烷和甲苯，于索氏抽提器中抽提24小時。水中多氯聯 苯的提取方法主要有三種：（1）使用有機溶劑液-液萃取；（2）使用填充柱吸附；（3）堿性水溶液分解-水蒸氣蒸餾法。常用溶劑有正己烷和二氯甲烷，常用吸附劑有活性碳、石墨、高分子大口徑網狀吸附樹脂（尤其是美國的XAD系列），常用洗脫劑有乙醚、甲醇、二氯甲烷、甲酮、二甲基亞砜。對空氣樣本在采樣后，用以下有機溶劑進行洗脫抽提，主要為：丙酮、甲苯、苯、二氯甲烷。對于植物樣本首先冰凍脫水，然后在適當有機溶劑作用下微波消化，常用溶劑為：二氯甲烷、甲苯-丙酮（1：1體積比）、甲苯-乙醇（3：1體積比）。所有樣本提取后的有機溶劑在進行凈化前，都要濃縮以利于下一步操作。
凈化 經過抽提步驟多氯代二苯并二惡英/呋喃和多氯聯苯絕大部分進入了提取液中，但同時進入的還包括有機農藥、脂肪物質、多環(huán)芳烴、葉綠素等，這些物質的存在會干擾二惡英類物質的檢測，因此必須進行凈化去除干擾物質。用于凈化的方法主要有以下方法：液-液分配、濃硫酸磺化、堿解、氧化、柱層析（包括凝膠色譜和液相色譜）。凈化方法的選擇主要依靠于樣本的類型、抽提溶劑的種類等。液-液分配只能去除部分雜質，經酸/堿處理的樣品，通過己烷處理可去除部分雜質；經有機溶劑處理的樣品在堿性溶液中分配可去除酸性雜質，但堿處理時間不能太長否則二惡英會分解；經有機溶劑提取的樣本用濃硫酸磺化，可去除脂肪、色素等雜質。柱層析往往采取幾根層析柱串聯或多種填料填充柱的方法，目前主要采用兩種方法相結合的方法，即采用兩根多種填料填充柱。其中第一根柱由上至下依次填充硅酸鉀、硅膠、硅酸鉀或硅酸銫、硅膠、活性碳，第二根采用串聯柱依次填充硅酸鉀或硅酸銫、硫酸飽和硅膠、活性氧化鋁[72]。但是填充柱使用的填料及組合方式多樣，有數十種。佛羅里達毛細管柱（130度激活）可將共平面多氯聯苯、多氯代二苯并二惡英/呋喃和非共平面多氯聯苯分別開來。佛羅里達柱依次用乙烷和二氯甲烷洗脫，收集洗脫液，第一部分為非共平面多氯聯苯，第二部分則包括共平面多氯聯苯、多氯代二苯并二惡英/呋喃可用于分析。最近有發(fā)展了三種將共平面多氯聯苯與多氯代二苯并二惡英/呋喃分離的吸附劑，（1）多孔石墨碳，（2）2-（1-芘基）-乙烷基甲基silylated硅膠，（3）C60/V70fullerenes bonded to polystyrene-divinylbenzene（聚苯乙烯-二乙烯基苯）。這三種吸附劑具有相同的洗脫特性，所須洗脫劑少。但這三種吸附劑比較昂貴，樣本容量小，并且要求所進樣品不含脂質和其它共存物。使用高效液相色譜來凈化抽提物是近幾年才發(fā)展起來的，并且也有用薄層色譜來凈化提取物的。
測定 二惡英類化學物質的測定采用過高效液相色譜、高效薄層色譜和氣相色譜，其中氣相色譜技術遠優(yōu)于另外兩者。所用的氣相色譜柱包括填充柱和毛細管柱，毛細管柱以其所需樣品少、柱效高已逐漸取代了填充柱。普通填充柱內徑為2~6mm，柱長1~3m，柱容量大，但精密度及靈敏度不行。毛細管柱長一般25~60 m，內徑為0.20~0.32 mm，涂層厚度為0.15~0.33 μm，以前多使用不銹剛和玻璃毛細管柱，現在以熔融石英為材料的毛細管柱正得到廣泛使用。最近，SUPELCO公司推出了二惡英專用毛細管柱，它極性較強，能分離TCDDs，最高使用溫度為275度。盡管人們近年來在分離上做了大量的工作，但想在一根柱上分離全部的異構體是不可能的。表1列出了色譜柱選擇的一些標準。
提取 這步目的在于使待測物游離，并萃取進入用于抽提的溶劑中。該步對于檢測的重復性至關重要，主要是溶劑的選擇和提取方法的選擇，且不同的樣本需采用不同的提取方法。對于土壤、灰塵等樣本使用溶劑有甲苯、乙烷、二氯甲烷、二氯甲烷和丙酮混合液（1：1體積比）、二氯甲烷和丙烷混合液（1：1體積比）、苯，提取時間為12~60小時。并且通常采用索氏抽提，Hengstmann等曾研究采用超音速索氏抽提（supersonic Soxhlet extraction），超臨界流體抽提（supercritical fluid extraction）也已使用，Barnabas對此進行了詳細綜述。對生物樣本一般是在冰凍后與無水硫酸鈉共同研磨去除水分，然后再采用合適的溶劑提取。常用溶劑有：輕石油-丙酮-乙烷-二乙基乙醚（18：10：5：2體積比）、丙酮-乙烷（1：1體積比）、丙酮-戊烷（3：7體積比）、丙請、二氯甲烷和乙烷混合液（1：1體積比）、氯仿-甲醇-乙烷混合液（1：1：1體積比）。其中二氯甲烷和乙烷混合液用于血樣，丙請和氯仿-甲醇-乙烷混合液用于奶樣，其余用于脂肪和肌肉組織。血樣提取前常添加乙醇和硫酸銨飽和溶液，然后再抽提。奶樣則先用甲酸處理。生物樣本提取方法，除血樣和奶樣是于室溫下振蕩提取外，其它樣品一般用Dean Stark的儀器進行索氏抽提。水樣中二惡英的抽提一般使用二氯甲烷和甲苯，于索氏抽提器中抽提24小時。水中多氯聯 苯的提取方法主要有三種：（1）使用有機溶劑液-液萃取；（2）使用填充柱吸附；（3）堿性水溶液分解-水蒸氣蒸餾法。常用溶劑有正己烷和二氯甲烷，常用吸附劑有活性碳、石墨、高分子大口徑網狀吸附樹脂（尤其是美國的XAD系列），常用洗脫劑有乙醚、甲醇、二氯甲烷、甲酮、二甲基亞砜。對空氣樣本在采樣后，用以下有機溶劑進行洗脫抽提，主要為：丙酮、甲苯、苯、二氯甲烷。對于植物樣本首先冰凍脫水，然后在適當有機溶劑作用下微波消化，常用溶劑為：二氯甲烷、甲苯-丙酮（1：1體積比）、甲苯-乙醇（3：1體積比）。所有樣本提取后的有機溶劑在進行凈化前，都要濃縮以利于下一步操作。
凈化 經過抽提步驟多氯代二苯并二惡英/呋喃和多氯聯苯絕大部分進入了提取液中，但同時進入的還包括有機農藥、脂肪物質、多環(huán)芳烴、葉綠素等，這些物質的存在會干擾二惡英類物質的檢測，因此必須進行凈化去除干擾物質。用于凈化的方法主要有以下方法：液-液分配、濃硫酸磺化、堿解、氧化、柱層析（包括凝膠色譜和液相色譜）。凈化方法的選擇主要依靠于樣本的類型、抽提溶劑的種類等。液-液分配只能去除部分雜質，經酸/堿處理的樣品，通過己烷處理可去除部分雜質；經有機溶劑處理的樣品在堿性溶液中分配可去除酸性雜質，但堿處理時間不能太長否則二惡英會分解；經有機溶劑提取的樣本用濃硫酸磺化，可去除脂肪、色素等雜質。柱層析往往采取幾根層析柱串聯或多種填料填充柱的方法，目前主要采用兩種方法相結合的方法，即采用兩根多種填料填充柱。其中第一根柱由上至下依次填充硅酸鉀、硅膠、硅酸鉀或硅酸銫、硅膠、活性碳，第二根采用串聯柱依次填充硅酸鉀或硅酸銫、硫酸飽和硅膠、活性氧化鋁[72]。但是填充柱使用的填料及組合方式多樣，有數十種。佛羅里達毛細管柱（130度激活）可將共平面多氯聯苯、多氯代二苯并二惡英/呋喃和非共平面多氯聯苯分別開來。佛羅里達柱依次用乙烷和二氯甲烷洗脫，收集洗脫液，第一部分為非共平面多氯聯苯，第二部分則包括共平面多氯聯苯、多氯代二苯并二惡英/呋喃可用于分析。最近有發(fā)展了三種將共平面多氯聯苯與多氯代二苯并二惡英/呋喃分離的吸附劑，（1）多孔石墨碳，（2）2-（1-芘基）-乙烷基甲基silylated硅膠，（3）C60/V70fullerenes bonded to polystyrene-divinylbenzene（聚苯乙烯-二乙烯基苯）。這三種吸附劑具有相同的洗脫特性，所須洗脫劑少。但這三種吸附劑比較昂貴，樣本容量小，并且要求所進樣品不含脂質和其它共存物。使用高效液相色譜來凈化抽提物是近幾年才發(fā)展起來的，并且也有用薄層色譜來凈化提取物的。
測定 二惡英類化學物質的測定采用過高效液相色譜、高效薄層色譜和氣相色譜，其中氣相色譜技術遠優(yōu)于另外兩者。所用的氣相色譜柱包括填充柱和毛細管柱，毛細管柱以其所需樣品少、柱效高已逐漸取代了填充柱。普通填充柱內徑為2~6mm，柱長1~3m，柱容量大，但精密度及靈敏度不行。毛細管柱長一般25~60 m，內徑為0.20~0.32 mm，涂層厚度為0.15~0.33 μm，以前多使用不銹剛和玻璃毛細管柱，現在以熔融石英為材料的毛細管柱正得到廣泛使用。最近，SUPELCO公司推出了二惡英專用毛細管柱，它極性較強，能分離TCDDs，最高使用溫度為275度。盡管人們近年來在分離上做了大量的工作，但想在一根柱上分離全部的異構體是不可能的。表1列出了色譜柱選擇的一些標準。