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DNA導入哺乳動物細胞常見的方法

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2006-07-08

名稱

機制

轉染效率

用途

優(yōu)缺點

影響因素

磷酸鈣轉染法

內吞作用

20%細胞被轉染

瞬時表達

1、簡單有效

2、適用于貼壁、非貼壁細胞

  3、常作首選方法

1、Ca2 ,DNA濃度

2、PH值,沉淀反應時間

  3、氯喹,甘油和丁酸鈉處理

DEAE葡聚糖轉染法

抑制核酸酶

內吞作用

BDC-1,CV-1和COS細胞中較高

瞬時表達

操作簡單

1、需高濃度DNa

2、DEAE葡聚糖濃度

  3、溫育時間

Poly-brene轉染法

不清楚

低分子量DNA轉染率高于磷酸鈣法

CHO細胞的穩(wěn)定轉化子

能得到較多的穩(wěn)定轉化子

1、受體細胞類型

2、轉染調控信號

  3、DNA濃度

原生質體融合

胞膜融合

50-100%轉染,穩(wěn)定子得率為0.2-0.02%

瞬時表達

穩(wěn)定表達

1、操作復雜

2、不能進行共轉染

  3、慎用于篩選營養(yǎng)缺陷型變異株

1、溶菌酶、PEG濃度

2、溫育時間

電穿孔

高壓在膜上形成微孔

效率較高

瞬時表達

穩(wěn)定轉化

1、需精密儀器

2、可用于動物、植物細胞和細菌

1、電場強度

2、脈沖長度

  3、溫度,DNA濃度

  4、培養(yǎng)液

脂質體

脂膜融合

50-60%轉染

瞬時表達

穩(wěn)定轉化

1、操作簡單

2、可用于體內試驗

1、脂質體質量

2、DNA濃度

胞核微注射法

直接注射

50-100%轉染

穩(wěn)定轉化

1、需要特殊儀器

2、處理樣品數(shù)量少

  3、高效

1、注射技術

2、DNA濃度

 

 

 
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