為了避免每次配制培養(yǎng)基都要對幾十種化學藥品進行稱量,應該將培養(yǎng)基中的各種成分,按原量10倍、100倍或1000倍稱量,配成濃縮液,這種濃縮液叫做母液。這樣,每次配制培養(yǎng)基時,取其總量的1/10、1/100、1/1000,加以稀釋,即成培養(yǎng)液。現(xiàn)將培養(yǎng)液中各類物質(zhì)制備母液的方法說明如下。
(1)大量元素。大量元素包括硝酸銨等用量較大的幾種化合物。制備時,按表中排列的順序,以其10倍的用量,分別稱出并進行溶解,以后按順序混在一起,最后加蒸餾水,使其總量達到1升,此即大量元素母液。
(2)微量元素。因用量少,為稱量方便和精確起見,應配成100倍或1000倍的母液。配制時,每種化合物的量加大100倍或1000倍,逐次溶解并混在一起,制成微量元素母液。
(3)鐵鹽。鐵鹽要單獨配制。由硫酸亞鐵(FeSO4·7H2O)5.57克和乙二胺四乙酸二鈉(Na—EDTA)7.45克溶于1升水中配成。每配1升培養(yǎng)基,加鐵鹽5毫升。
(4)有機物質(zhì)。主要指氨基酸和維生素類物質(zhì)。它們都是分別稱量,分別配成所需的濃度(0.1~1.0毫克/毫升),用時按培養(yǎng)基配方中要求的量分別加入。
(5)植物激素。最常用的有生長素和細胞分裂素。這類物質(zhì)使用濃度很低,一般為0.01~10毫克/升。可按用量的100倍或1000倍配制母液,配制時要單個稱量,分別貯藏。
配制植物生長素時,應先按要求濃度稱好藥品,置于小燒杯或容量瓶中,用1~2毫升0.1N(克當量濃度)氫氧化鈉溶解,再加蒸餾水稀釋至所需濃度。配制細胞分裂素時,應先用少量0.5或1N的鹽酸溶解,然后加蒸餾水至所需量。
以上各種混合液(母液)或單獨配制藥品,均應放入冰箱中保存,以免變質(zhì)、長霉。至于蔗糖、瓊脂等,可按配方中要求,隨稱隨用。