RNA干涉(RNA interference, RNAi)作為研究基因功能的一種有效方法已經被全世界范圍內的研究者廣泛接受。作為基因抑制的一種有力工具,與其他的方法相比,RNAi的操作過程更簡單,成功率更高。通過RNAi,你可以實現(xiàn)對特定的mRNA的選擇性降解,進而抑制其翻譯過程。例如,Eg5是有絲分裂正常進行所必需的蛋白,當用RNAi方法抑制其表達后,在細胞的有絲分裂過程中就會產生不正常的三極紡錘體(圖1),這一結果表明,RNAi技術可以用來確定參與有絲分裂過程的蛋白質,同時證明了相關基因的功能。
在對哺乳動物細胞的研究中,最常用的RNAi方法是向細胞內轉染短的雙鏈RNA分子(double-standed RNA,dsRNA),又稱為小的干涉RNA分子(short interfering, siRNA)。但是,在應用siRNA的實驗中,存在著以下三個方面的潛在問題,或者說是挑戰(zhàn):
· siRNA會引起非特異性的細胞壓力反應(stress response),導致細胞的死亡或改變許多基因的正常表達水平,致使對RNA干涉結果的分析變的很困難;
· siRNA的正負鏈的任何可能的非特異的同源性都要盡力避免,否則目標mRNA的翻譯就不會被有效抑制;
· dsRNA在細胞培養(yǎng)以及體內實驗的穩(wěn)定時間都比較短。
Stealth RNAi是新一代的RNA干涉分子,解決了以上所提到的問題,同時也保持了RNAi的高效性。它是經過化學修飾的dsRNA分子,有效地消除了細胞的壓力反應,使實驗的結果更加清晰;這種修飾也提高了其靶向特異性及其穩(wěn)定性。
Stealth RNAi的優(yōu)點概述如下:
· 消除或減少了細胞的非特異性壓力反應;
· 提高了靶向特異性;
· 提高了在血液中的穩(wěn)定性。
使用Stealth RNAi可以得到更加清晰的結果,加速基因功能的研究進程!