色譜柱是高效液相色譜的心臟，在高效液相色譜儀的使用中，保持色譜柱的柱效、容量和滲透性，延長柱子的使用壽命非常重要。色譜柱壓升高一般是由于柱床內產生了雜質，造成流體阻力加大所致。淺析其原因，大致有以下幾方面：

 

1、流動相的前處理

 

雜質堵塞色譜柱進口濾片，導致壓力升高。這往往是由于流動相沒有過濾，或雖已過濾但過濾不徹底，使固體雜質滯留于濾板上所造成的。

 

2、樣品的沉淀

 

當溶解樣品的溶劑與流動相不一致時，樣品進入色譜柱，有時可能因溶解度降低而沉淀出來，造成壓力升高。

 

3、晶體的析出

 

使用含有緩沖液的流動相時，緩沖液中的無機鹽可能會殘留在體系之中，它們會因在新流動相中的溶解度降低而析出，造成流體阻力加大、壓力升高。

 

4、細菌或霉菌孳生

 

霉菌在流動相中、管路中或柱子進口處繁殖、生長堵塞濾板，導致壓力升高。所以在使用磷酸鹽緩沖液時一般要現(xiàn)配現(xiàn)用。

 

5、溶質吸附

 

當溶質在柱子上有較強的吸附，且所用的流動相難以將它們洗脫時，累積的未洗脫溶質也會造成阻力增大和壓力升高。7、壓力脈沖

 

運行過程中，有時會產生系統(tǒng)內壓力的突然升降。如此所形成的壓力脈沖會造成多孔填料的崩壞和柱床結構的微小變化，填料微屑的長期積累也可能會使柱床阻力增大，造成壓力升高。

 

6、流動相更換過度較快

 

當改變流動相體系時，不徹底的更換使不同性質、互不混溶的流動相存在于同一個體系之中，也會造成壓力升高。