1.范圍:
用高效液相色譜法測定辣椒及辣椒制品中辣椒素類物質的方法及辣度表示方法。
本標準適用于辣椒和辣椒制品中辣椒素類物質的測定及辣度的表示。
本方法的檢出限:辣椒素、二氫辣椒素均為1mg/Kg,線性范圍為1mg/L-150mg/L。
2.試樣提。
在樣品中加入甲醇—四氫呋喃混合溶劑25ml,用保鮮膜封口,用針扎幾個小孔,然后在60度水浴條件下,使用超聲波震蕩器提取30min。用濾紙過濾,收集濾液,然后將濾渣連同濾紙重新加甲醇—四氫呋喃混合溶劑25ml,使用超聲波震蕩器提取10min,重復兩次,將三次過濾收集的濾液合并,用旋轉蒸發(fā)器在70度溫度下濃縮至10ml—20ml,然后用甲醇—四氫呋喃混合溶劑定容至50ml,經0.45?m濾膜過濾后進行色譜分析。根據樣品中辣椒素類物質總量和檢測器的靈敏度,必要時可以適當調整稀釋倍數。
3.色譜參考條件:
色譜柱:KromasilC-18(4.6mm*250mm5um)
流動相:甲醇:水=65:35
進樣量:10?l
流速:1.0ml/min
紫外檢測波長:280nm
柱溫箱溫度:30℃
4.結果:
按照色譜條件,進行HPLC分析,用標準物質色譜峰的保留時間定性;根據辣椒素、二氫辣椒素標準曲線及試樣中的峰面積定量。具體的色譜圖及結果顯示見下圖: