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快速開發(fā)反相固相萃取的方法的建議

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2013-04-02  來源:中國檢測服務(wù)網(wǎng)
核心提示:Log P (分配系數(shù))的定義:分配系數(shù)是一個(gè)非離子化的化合物在兩種不互溶的溶劑中達(dá)到平衡后,在每種溶劑中的濃度比例。 一般用水
 Log P (分配系數(shù))的定義:分配系數(shù)是一個(gè)非離子化的化合物在兩種不互溶的溶劑中達(dá)到平衡后,在每種溶劑中的濃度比例。

    一般用水(水相)和辛醇(Octanol疏水的有機(jī)溶劑)做為計(jì)算化合物分配系數(shù)兩種溶劑。就是說,一個(gè)化合物加入這兩種混合溶劑內(nèi),達(dá)到平衡后,然后用UV/Vis來定量計(jì)算化合物在每一種溶劑中的量。Log P 的決定是根據(jù)下面的方程式。

    Log Poctanol/water=Log (溶質(zhì)在辛醇的濃度/溶質(zhì)在水中的濃度)

    這個(gè)值可以反應(yīng)出一個(gè)被分析物的親水性和疏水性的程度

    Log P = 1 表示10 :1 有機(jī):水性 (稍稍疏水性)

    Log P = 0表示 1 :1 有機(jī):水性 (親水和疏水性相同)

    Log P = -1表示 1 :10 有機(jī) :水性(稍稍親水性)

    以下提供一些實(shí)際的例子, 以 Log P由小變大(疏水性逐漸增加)

    (1)Urea (尿素) Log P = -2.11

    (2)Dopamine(多巴胺) Log P = -0.98

    (3)Atenolol (阿替洛爾) Log P = 0.16

    (4)Picric Acid ( 苦味酸) Log P = 1.33

    (5)Testosterone (睪酮) Log P = 3.32

    (6)THC (四氫大麻醇) Log P = 7.6

    由化學(xué)結(jié)構(gòu)可以知道尿素是比睪酮極性大,但是Log P的計(jì)算可以定量出尿素比睪酮的極性大100,000 倍,F(xiàn)在讓我們看看如何利用 Log P 來協(xié)助我們固相萃取的方法開發(fā)。

    最成功的固相萃取的方法是充分利用“開和關(guān)”的原則,就是說:是否被分析物能否完全吸附或是完全沒法吸附在固相萃取填料上?一個(gè)分析物的Log P 是回答這個(gè)問題的很好的工具,特別是在反相固相萃取的方法開發(fā)。

    (1)當(dāng)使用Strata X(高分子基質(zhì))時(shí), 基本原則是這填料可以吸附非離子化化合物的Log P大于-1.0
    (2)當(dāng)使用 Strata- C18-E(硅膠基質(zhì))可以吸附非離子化合物的Log P大于+ 1.0
    所以說,Strata-X可以被用來吸附稍帶極性的化合物。我們?cè)龠M(jìn)一步舉個(gè)實(shí)例,上面提到的化合物中,尿素的Log P 是-2.11 ,就沒辦法使用Strata-X 或是 Strata-C18-E。同樣的,多巴胺和阿替洛爾,沒法使用Strata-C18-E, 因?yàn)檫@兩個(gè)化合物的Log P都是小于+1.0。Log P 也可以用來決定在反相固相萃取方法開發(fā)時(shí)要使用多強(qiáng)的溶劑來清洗。Log P愈高時(shí)意味著可以被吸附的很強(qiáng),就可以用較激烈的方法來清洗。  

    例如說使用Strata-X時(shí),睪酮可以用60% 的甲醇來清洗。 這也可以說是預(yù)料之中,因?yàn)椴G酮是非常大的疏水性化合物,它的Log P是3.32 (如果需要睪酮的固相萃取的方法,可以和我們索取編號(hào)–TN-0017)。

    總之, 一個(gè)化合物的Log P是很好固相萃取方法開發(fā)的“指南針”。 
    當(dāng)然Log P只是其中的一個(gè)指導(dǎo)參數(shù),我們?cè)陂_發(fā)方法時(shí)還是不能忽略被分析物的其他性質(zhì),如此才能夠全方位的考慮到所有性質(zhì)已建立出最好的方法。

編輯:songjiajie2010

 
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關(guān)鍵詞: 反相固相萃取
 

 
 
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