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PCR實驗室能杜絕污染嗎?

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2022-02-28
核心提示:目前PCR實驗室的建設(shè)應(yīng)分三個區(qū)域,試劑準備區(qū)、核酸制備區(qū)和PCR擴增區(qū),實驗室分區(qū)的主要目的是避免純化核酸和擴增產(chǎn)物逆向污染

目前PCR實驗室的建設(shè)應(yīng)分三個區(qū)域,試劑準備區(qū)、核酸制備區(qū)和PCR擴增區(qū),實驗室分區(qū)的主要目的是避免純化核酸和擴增產(chǎn)物逆向污染前一個區(qū)域,但多年的經(jīng)驗表明,無論是三區(qū)還是四區(qū)的設(shè)置,似乎都沒有完全杜絕實驗室污染的發(fā)生。


那么PCR實驗室究竟應(yīng)如何建設(shè)才能有利于污染的預(yù)防和有效清除?


其實污染就是PCR擴增管中摻入了原來樣本不存在的擴增核酸,那么這個不受歡迎的核酸是怎么來到PCR擴增管里的?如果排除試劑盒、儀器和人員操作等環(huán)節(jié),核酸氣溶膠和灑落的樣本與核酸的清除是實驗室建設(shè)應(yīng)該重點考慮的環(huán)節(jié)。


實驗室的建設(shè)首先要有通風設(shè)置,通風是PCR實驗室建設(shè)應(yīng)該考慮的基本條件,如果采用封閉彩鋼板建設(shè)的實驗室,應(yīng)進行壓差設(shè)置,即自試劑準備室、核酸制備室到擴增室依次呈負壓,但清潔新風應(yīng)從室外引進,新風過濾網(wǎng)應(yīng)定期更換,否則便成為污染的來源。其次是實驗室墻面和地面具有防水功能,也就是墻面和地面可以水洗!每個房間設(shè)置地漏,方便實驗室的清潔,當實驗室污染發(fā)生時,即可使用“水洗實驗室”的方法有效清除污染,清除過程使用的是0.2%有效氯溶液,它不但有效斷裂核酸片段,而且還具有淬滅熒光基團,有利于PCR實驗室熒光本底的去除。但過量使用反而會影響試劑擴增效率。消毒清洗后應(yīng)該使用自來水或清潔水進行再次清洗,特別是設(shè)備表面。實驗室空氣中的污染清除,可以用有效氯溶液進行噴霧。 
編輯:songjiajie2010

 
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關(guān)鍵詞: 污染
 

 
 
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